Forschungspeptide werden meist als lyophilisiertes (gefriergetrocknetes) Pulver geliefert, weil sie so bei Versand und Lagerung deutlich stabiler sind. Bevor sie in der Laborarbeit verwendet werden können, muss dieses Pulver in einer Flüssigkeit gelöst werden — ein Schritt namens Rekonstitution. Sorgfältig durchgeführt, ergibt sie eine klare Forschungslösung mit einer Konzentration, die Sie berechnet und festgehalten haben.
Diese Anleitung beschreibt das Rekonstitutionsverfahren ausschließlich als Labortechnik — Lösungsmittelwahl, korrektes Zugeben und Berechnen der resultierenden Konzentration. Sie beschreibt keine Verwendung der entstehenden Lösung über die Laborforschung hinaus, und nichts hier ist eine Anleitung zur Anwendung am Menschen oder Tier.
- Die Rekonstitution löst ein gefriergetrocknetes Peptid in einem Lösungsmittel zu einer Forschungslösung.
- Das übliche Lösungsmittel für die Forschungshandhabung ist bakteriostatisches oder steriles Wasser.
- Das Lösungsmittel langsam an der Innenwand des Fläschchens hinzugeben und sanft schwenken — niemals schütteln.
- Konzentration = Gesamtpeptid (mg) ÷ zugegebenes Lösungsmittel (mL). Festhalten.
Was Rekonstitution bedeutet
Ein lyophilisiertes Peptid ist ein fester Pellet oder Film am Boden eines versiegelten Fläschchens. Rekonstituieren bedeutet einfach, ein abgemessenes Volumen Lösungsmittel zuzugeben, damit sich das Peptid in Lösung löst. Die Peptidmenge im Fläschchen ändert sich nicht — Sie wählen nur, in wie viel Flüssigkeit Sie es lösen, und diese Wahl legt die Endkonzentration fest.
Was das Verfahren verwendet
Drei Dinge: das versiegelte Peptidfläschchen; ein geeignetes Lösungsmittel — bakteriostatisches Wasser (Wasser mit etwas Benzylalkohol, der ein Mehrweg-Fläschchen stabil hält) oder steriles Wasser für den Einmalgebrauch; und eine saubere Messspritze, um ein genaues Volumen Lösungsmittel zu übertragen. Arbeiten Sie auf einer sauberen Fläche und wischen Sie die Fläschchenstopfen zuerst mit einem Alkoholtupfer ab.
Die grundlegenden Schritte
- Legen Sie das Lösungsmittelvolumen im Voraus fest — es bestimmt Ihre Konzentration (siehe nächster Abschnitt).
- Ziehen Sie dieses Volumen Lösungsmittel in die Messspritze auf.
- Führen Sie die Nadel in das Peptidfläschchen ein und lassen Sie das Lösungsmittel langsam an der Innenwand des Glases hinunterlaufen — nicht direkt auf den Peptid-Pellet.
- Entfernen Sie die Spritze und schwenken Sie das Fläschchen sanft oder lassen Sie es stehen, bis die Lösung vollständig klar ist. Nicht schütteln.
- Bleibt etwas ungelöst oder ist die Lösung trüb, lassen Sie sie ruhen; sanftes Erwärmen auf Raumtemperatur kann helfen.
Die Konzentration berechnen
Die Konzentration ist einfach die Peptidmenge geteilt durch das zugegebene Lösungsmittelvolumen. Enthält ein Fläschchen 10 mg Peptid und Sie geben 2 mL Lösungsmittel zu, ist die Lösung 10 ÷ 2 = 5 mg pro mL. Geben Sie stattdessen 1 mL zu, ist dasselbe Fläschchen 10 mg/mL; bei 5 mL sind es 2 mg/mL. Die Peptidmenge ist durch das Fläschchen festgelegt — das Lösungsmittelvolumen steuern Sie. Beschriften Sie das Fläschchen immer mit Konzentration und Datum.
